實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>
曠場實(shí)驗(yàn)（Open Field Test, OFT）是評估嚙齒類動物自主活動、探索行為及焦慮樣行為的經(jīng)典范式。通過量化動物在開放空間中的運(yùn)動軌跡、區(qū)域偏好及刻板行為，可反映中shu神經(jīng)系統(tǒng)功能狀態(tài)及藥wu/基因干預(yù)效應(yīng)。
實(shí)驗(yàn)設(shè)備與環(huán)境
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材質(zhì)：白色亞克力/PVC板材（規(guī)格：50cm×50cm×40cm，底部分為25個等距方格）。
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區(qū)域劃分：中央?yún)^(qū)（20cm×20cm）與外周區(qū)，邊緣設(shè)1cm高黑色邊界線。
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光照：頂部LED燈提供均勻漫射光（30-50 lux，避免陰影干擾）。
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記錄系統(tǒng)：頂部攝像頭（幀率≥30fps）連接行為學(xué)分析軟件（如supermaze、visutrack）。
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溫度：22±2℃，濕度40-60%，噪聲≤60dB。
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實(shí)驗(yàn)時間：選擇小鼠活躍期（09:00-12:00），每只動物測試間隔≥10分鐘以清chu氣味。
實(shí)驗(yàn)流程
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動物適應(yīng)
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實(shí)驗(yàn)前3天每日撫摸小鼠1-2分鐘，減少人為應(yīng)激。
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實(shí)驗(yàn)當(dāng)日將動物提前30分鐘轉(zhuǎn)移至測試房間，適應(yīng)環(huán)境。
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操作步驟
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步驟1：輕握小鼠尾部，將其頭朝外壁置于曠場中央，同步啟動錄像。
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步驟2：連續(xù)記錄5分鐘行為，實(shí)驗(yàn)者遠(yuǎn)離裝置（距離≥2m）。
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步驟3：實(shí)驗(yàn)后用75%乙醇擦拭曠場，避免氣味殘留。
核心行為學(xué)指標(biāo)
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指標(biāo)
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定義
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參考值（C57BL/6J小鼠）
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臨床意義
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中央?yún)^(qū)進(jìn)入次數(shù)（次）
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四肢完全進(jìn)入中央?yún)^(qū)的次數(shù)
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應(yīng)激強(qiáng)度標(biāo)志，焦慮時顯著增加
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數(shù)據(jù)分析方法
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軌跡分析：軟件自動劃分中央/外周區(qū)，計算各區(qū)域停留時間占比（中央?yún)^(qū)占比<15%提示高焦慮）。
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統(tǒng)計方法：組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)或ANOVA，顯著性水平設(shè)為p<0.05（SPSS/GraphPad）。
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異常值處理：剔除不動（總移動<200cm）或過度活躍（>1500cm）個體。
注意事項(xiàng)
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動物狀態(tài)：選用8-12周齡健康雄鼠（體重20-25g），雌鼠因動情周期影響需同步化。
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藥wu干預(yù)：需設(shè)置溶劑對照組，注射后30分鐘開始實(shí)驗(yàn)（藥wu半衰期匹配）。
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重復(fù)測試：同一批動物間隔≥7天復(fù)測，避免習(xí)慣化效應(yīng)。
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倫理要求：遵循3R原則，實(shí)驗(yàn)后動物可繼續(xù)用于其他非侵入性測試。
質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)
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